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3 Materiales3.1-Fluidos corporales:Fluídos corporales obtenidos experimentalmente En estado líquido (sin soporte): Se emplearon muestras de sangre anticoagulada con EDTA al 5% y de semen sin tratamiento previo, obtenidas de donantes voluntarios. Fluídos biológicos en soportes sólidos: Manchas de Sangre. Se emplearon, para la implementación de las técnicas de extracción y purificación de ADN, muestras de sangre de un mililitro cada una, voluntariamente cedidas por donantes. Estas muestras fueron distribuídas sobre diferentes soportes: papel de diario, tela de algodón y vidrio. El material seco así depositado y expuesto a temperatura ambiente dentro del laboratorio, fue posteriormente empleado para extraer ADN. Con el objeto de evaluar la eficiencia de las técnicas de extracción usadas y comprobar la antigüedad máxima de las manchas a ser analizadas, las extracciones se llevaron a cabo sobre media mancha (equivalente a 0,5 mililitros de sangre), a intervalos regulares de tiempo (desde tiempo=0 hasta veinte meses). Las muestras obtenidas se resumen en la tabla I. TABLA I
Mezclas de Semen/sangre. Para implementar y desarrollar sistemas eficientes de purificación de ADN a partir de mezclas de semen y sangre, semejante a las halladas en los hisopados obtenidos luego del ataque sexual, se depositaron sobre hebras de algodón muestras de sangre/semen en diferentes proporciones, entre 5 y 500 ul de cada fluído. La evaluación del sistema de extracción se realizó mediante la comparación de los patrones de hibridación obtenidos luego del sondeo con secuencias de locus específico. Las mezclas se prepararon de acuerdo a la tabla II. TABLA II
Muestras obtenidas de casos reales Muestras forenses provenientes de violaciones Se analizaron los materiales que se detallan en la TABLA III. En éstas se considera cada caso en particular, numerado en forma correlativa (Caso nro.), el material analizado, de acuerdo a las siguientes abreviaturas y correspondiente detalle: HV, hisopado vaginal; HR, hisopado rectal; SD, sangre de la damnificada; SS, sangre del sospechoso; PR, prenda. Los números indican cantidades de hisopados, muestras de sangre o prendas. TABLA III
Otras muestras forenses que involucran fluídos biológicos en soportes sólidos:
(*) los casos 13, 14 y 23 corresponden a manchas de sangre embebidas y secas en condiciones óptimas, ya que las dos primeras fueron recibidas en el Servicio de Huellas Digitales Genéticas con motivo del Control de Calidad Internacional de EDNAP (European DNA Profiling), y la restante fué obtenida y remitida por un Laboratorio Forense provincial a los efectos del análisis. (**) en las muestras correspondientes a los casos 5, 16 y 25 se observa abundante fauna (larvas e insectos), lo cual presupone una conservación inadecuada. 3.2 Pelos
3.3 UñasSe recibieron siete casos que involucraban uñas provenientes de cadáveres. 3.4 Restos humanosEn colaboración con la Justicia Nacional y Juzgados Provinciales, se analizó material procedente de cadáveres en estado de descomposición diverso. Muestras empleadas en el estudio comparativo de métodos de extracción de ADN (pK/SDS vs. CTAB). TABLA V
Muestras utilizadas en la determinación de la eficiencia del análisis en material cadavérico TABLA VI
Referencias: B: presencia de tejidos blandos; H: reducción completa (material óseo únicamente); Q: quemados; S: saponificado; M: momificado. Los números indican cantidad de cadáveres estudiados. Material cadavérico procedente de desastres en masa: Muestras obtenidas en el atentado a la Embajada de Israel.
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