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Compilado por Gisela T. Perez Schweiger

El AND es extraido (de la mucosa bucal, sangre, o cualquier otro fluido biológico) y purificado usando una enzima que lo libera dentro de una solución.

Para determinar los marcadores genéticos, microsatélites o STRs. de ADN de una región particular se sigue uno de los siguientes métodos:

Se amplifica (clona) primers de ADN dirigidos a las regiones y la enzima del ADN polimersa (PCR), o Se corta con enzimas de restricción (RFLP)

Gráfico 1: radiografía de dos muestras de AND (1) posible padre y (2) niño

Las muestras de AND son entonces corridas a través de un sistema de capilares usando un método cromatográfico (llamado electroforesis por capilaridad) para conocer los tamaños

Un ejemplo de un procedimiento más antiguo llamado electroforesis por gel es mostrado en el gráfico 1 para mostrar el efecto de la separación cromatográfica. Un electrofenograma generado por computadora [gráfico 2] demuestra cómo los trazos de ADN pueden ser obtenidos usando un sistema de detección fluorescente. Es similar a la lectura de un código de barras , Este sistema ha reemplazado a la electroforesis por gel (ilustrado en el Gráfico 1)

Para visualizar el ADN:

Los primers son etiquetados antes de la reacción de la cadena de polimersa (PCR) Se utiliza una sonda etiquetada para hibridar en una región específica a ser examinada (RFLP)

Una vez que los trazos del ADN (marcadores) de una zona específica han sido determinados los mismos son representados por  un número universal (9, 10, 22) y referenciados a los alelos

Gráfico 2: Electroferograma mostrando los picos que representan los dos alelos en cada locus establecido del (i.e., D13S317, D7S820 and D16S539).

Cada persona tiene dos alelos para cada sistema examinado, salvo que a) un alelo se repita o b) uno sea un alelo silente. Un alelo es transferido por la madre y otro por el padre

Cada alelo conocido tiene una frecuencia determinada de ocurrencia en la población general y entre diferentes grupos étnicos [Tabla 1] estas frecuencias son usadas para calcular las probabilidades de paternidad, parentesco e identidad socio cultural

Tabla 1: Frecuencia alélica para un individuo caucásico-americano (N= número de alelos observados y AF= frecuencia alélica

 

Fuente: GeneTree.com